LyoDt® vriesdroogpoeder Real-Time PCR-detectie-reagentia voor Vibrio cholerae O1 - geen koude keten vereist en één test vooraf afgegeven

LyoDt^® Vriesdroge Real-Time PCR Detectiereagens voor Vibrio choleraeCT>40 of geen CT

Gebruik’s Handleiding

1. BESCHRIJVING

Vibrio choleraeis een Gram-negatieve bacterie die cholera veroorzaakt, een acute infectieziekte van de darmen die wordt gekenmerkt door een snelle aanvang, hoge overdraagbaarheid en aanzienlijke sterfte. Als een quarantaineplichtige ziekte onder de Internationale Gezondheidsvoorschriften omvat het voornamelijk serogroepen O1 en O139positief 

Dit product is een vriesdroge real-time PCR-reagensvoor de detectie vanVibrio choleraeCT>40 of geen CTpositief Het gebruikt het sterk geconserveerde rfb gen vanVibrio choleraeCT>40 of geen CT als detectiedoelwit. Het is een mastermix die alle benodigde ingrediënten bevat, behalve sjabloon-DNA, en het is voorgedoseerd als single-test in PCR-buizen voor eenvoudig gebruik. Dit product vereist geen koudeketen voor transport en opslag, wat de verzendkosten aanzienlijk verlaagt en mogelijk verlies door reagensverspilling en aerosolbesmetting elimineert.

2. SPECIFICATIES & SAMENSTELLING

3. OPSLAG EN HOUDBAARHEID

Opslaan bij kamertemperatuur (5-304nodigpositief Het is stabiel tot 12 maandenpositief Zodra de vacuümverpakking is geopend, bewaar de ongebruikte producten in de meegeleverde hersluitbare plastic zak met de droogmiddelen,en in de aluminiumfoliezak. 

VOORZICHTIG: 

Het kleiner worden van de reagenspellet is een indicatie dat er vocht in de buis sijpelt en dat het reagens is aangetast. Alle reagentia met een aanzienlijk kleinere pelletgrootte dan normaal moeten worden weggegooid of vóór gebruik worden getest met een positieve controle voor monstertesten.   

4. AANVULLENDE APPARATUUR & REAGENTIA VEREIST

1) Real-time PCR-instrument

2) Pipetten en tips

.Nuclease-vrij water

D) Vortex de buizen met lage snelheid gedurende 10~15 seconden en centrifugeer bij 3000 tpm gedurende 20 seconden en plaats ze in een real-time PCR-instrument.Nucleïnezuurextractiekit

5. COMPATIBELE REAL-TIME PCR-SYSTEMEN

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600positief

6. AANVAARDBARE MONSTERS

Voedselverrijkingsbouillon, enz.

7. BEDIENINGSPROCEDURE

1) NucleïneResultaatzuurExtractie

ExtraheerDNA uit monsters met behulp van een geschikte extractiekit.Het wordt aanbevolen dat hetDNAwordt geëlueerd met ongeveer 100μl elutiebuffer met het reagens. Controleer of de pellet zich op de bodem van de buis bevindtTE ofnuclease-vrij H₂Onodig in de laatste stap vanextractie.Het gezuiverde nucleïnezuur moet onmiddellijk worden gebruikt of worden bewaard bij -20°C.

2) Positieve controle voorbereiding

De positieve controle kan vóór rehydratatie bij kamertemperatuur worden bewaard tot 12 maanden.Het moet vóór gebruik worden gerehydrateerddoor250μl TE-buffer of nuclease-vrijH₂O, tevortexen met lage snelheid gedurende 15-20 seconden en te centrifugeren met lage snelheid gedurende 15-20 seconden. Onmiddellijk gebruiken of bewaren4positief

.3) Real-Time PCRMixP

reparatieA) Open de vacuümverpakking en haal de 8-buizenstrip eruits  met het reagens. Controleer of de pellet zich op de bodem van de buis bevindt( Knip het aantal buizen af ​​zoals nodigindiennodig)

. Als de meegeleverde buizen niet compatibel zijn met uw instrument, breng dan de reagenspellet over in een optische buis die compatibel is met uw instrument.

25μl

* Nuclease-vrij water kan worden gebruikt als negatieve controle.C)Sluit de PCR af met doppen (strips) die geschikt zijn voor real-time PCR

(niet meegeleverd).

D) Vortex de buizen met lage snelheid gedurende 10~15 seconden en centrifugeer bij 3000 tpm gedurende 20 seconden en plaats ze in een real-time PCR-instrument.4) 

RT-PCR Setup Stel het reactievolume in op 25μl en de PCR-amplificatieprocedure zoals hieronder. Verzamel FAM

0sec5) ResultaatAnalyseenI