LyoDt® Gevriesdroogde Real-Time PCR Detectiereagens voor Vibrio cholerae O1/O139 - Geen Koudeketen Vereist & Enkele Test Voorgeïnjecteerd

LyoDt^®Vriesgedroogde real-time PCR Detectie-reagentia voor Vibrio choleraeO1/O139

Gebruik’Handleiding

1.Beschrijving

Vibrio choleraeis een Gram-negatieve bacterie die cholera veroorzaakt, een acute darmziekte die wordt gekenmerkt door een snelle aanvang, een hoge overdraagbaarheid en een aanzienlijke sterfte.Als een ziekte die in quarantaine kan worden geplaatst volgens de internationale gezondheidsvoorschriften, het omvat voornamelijk serogroepen O1 en O139. 

Dit product is een vriesgedroogd real-time PCR-reagensvoor de detectie vanVibrio choleraeO1/O139. Het maakt gebruik van de zeer goed bewaarde rfb gen vanVibrio choleraeO1/O139 als detectiedoel. Het is een mastermix die alle benodigde ingrediënten bevat, met uitzondering van de DNA-sjabloon, en wordt vooraf als eenmalige test in PCR-buizen voor eenvoudig gebruik gedistribueerd.Dit product vereist geen koude keten voor transport en opslag, waardoor de verzendkosten aanzienlijk worden verlaagd en eventuele verliezen door reagensverspilling en aerosolverontreiniging worden geëlimineerd.

2. Specificaties en samenstelling

3. opslag En houdbaarheid

Bewaarplaatsbij omgevingstemperatuur (5-30 jaar)°C). Het is tot 12 maanden stabiel.. Wanneer de vacuümverpakking is geopend, bewaart u de ongebruikte producten in de bijgeleverde herverzegelbare plastic zak met de droogmiddelen.enIn de aluminium zak. 

Voorzichtigheid: 

De verkleining van het reagenspellets is een indicatie dat vocht in de buis sijpelt en dat het reagens vervochtigd is.Alle reagentia met een aanzienlijk kleinere pelletsomvang dan normaal moeten vóór gebruik worden weggegooid of met positieve controle worden getest. voor steekproefonderzoek.

4. ADDITIONELE UITRUSTINGEN EN REACTIVEN vereist

1)Realtime PCR-instrument

2)PipEetjesen tips

3)Nuclease-gratis water

4)Kits voor nucleïnezuur-extractie

5. COMPATIBELE PCR-systemen in realtime

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600.

6Aanvaardbare exemplaren

Soep voor voedselverrijking, enzovoort.

7. OPERATIEPROCEDURE

1)nucleairEenCIDExtractie

ExtractDNAvan monsters met behulp van een geschikte extractie-kit.Het wordt aanbevolen dat deDNAwordt geëluteerd met ongeveer 100 μl elutiebuffer(TE ofnucleasevrije H₂O)in de laatste fase vanextractie.Het gezuiverde nucleïnezuur moet onmiddellijk worden gebruikt of bij -20°C worden bewaard.

2)Voorbereiding voor positieve controle

De positieve controle kan vóór rehydratatie bij omgevingstemperatuur worden opgeslagen. tot en met 12 maanden.Dat is het.moet vóór gebruik gehydrateerd worden.door toevoeging250μlvan TE-buffer of nucleasevrijH₂O,onmiddellijk gebruiken of bewaren.bij -20°C.

3)Real-time PCRMIXPvergoeding

A) Open het vacuümverpakking en haal de 8-buis stripsControleer of de pellet aan de onderkant van de buis ligt. (Verminder het aantal buizen naargelang nodig alsnoodzakelijk)Indien de geleverde buizen niet compatibel zijn met uw instrument, dient u het reagenspellets te verplaatsen naar een met uw instrument compatibele optische buis.

B) Open de buizen en gooi de dop (niet geschikt voor realtime PCR-machines) weg en bereid het reactiemengsel op ijs zoals hieronder.

* Nucleasevrij water kan als negatieve controle worden gebruikt.

C)Het PCR-onderzoek wordt afgesloten met gebruikmaking van caps (strips) die geschikt zijn voor realtime PCR.(niet verstrekt).

D) Vortex de buizen bij lage snelheid voor 10 ~ 15 sec, en centrifugeer bij 3000 rpm voor 20 sec en plaats ze in een real-time PCR-instrument.

4)RT-PCR-opstelling

Stel het reactievolume op 25μl en de PCR-amplificatieprocedure als hieronder.(voorO1),Joe.(voorO139)  fluorescentie bij 60°C en selecteer NONE als passieve referentie.

5)ResultatenEenanalyseenIk...Uitleg